目前,检测仪器(设备)的3Q验证主要应用于药品生产检测、高效液相检测、气相检测等精密检测领域,在食品普通检测领域尤其是食品微生物检测领域应用比较少。高压蒸汽灭菌器灭菌效果可以直接影响到微生物检测结果,所以对微生物实验室所用的高压蒸汽灭菌器进行3Q验证具有重要的意义。通过对空载及满载时灭菌腔体内重现性热分布状况、灭菌腔体内最冷点上重复性热穿透性能、灭菌程序作用于生物指示剂效果等方面的评估,确认高压灭菌器所设定的灭菌程序的灭菌有效性,以保证微生物检测结果的准确性。但目前高压蒸汽灭菌器的3Q验证主要存在于制药行业,其验证方案并不完全适用于食品行业微生物检测领域,所以本文对微生物实验室用高压蒸汽灭菌器的验证方法及步骤进行研究,以总结一套适用于微生物检测实验室的3Q验证方案。

1 验证步骤

高压蒸汽灭菌器的3Q验证通常可以分成安装确认,运行确认和性能确认三个阶段实施。

1.1 系统描述

对高压蒸汽灭菌器进行系统描述,明确使用范围、腔体容积、灭菌原理、制造材料、设备控制等方面信息。

1.2 安装确认(IQ)

根据安装确认方案执行高压蒸汽灭菌器安装前后各系统符合性、技术资料完整性等方面的确认,记录每个确认结果,根据结果批准是否进行运行验证。若在确认过程中发现偏差,则需要简单描述偏差、记录纠偏措施及完成时间,确认纠偏后方可批准进行运行验证。

1.3 运行确认(OQ)

根据运行确认方案执行确认及验证高压蒸汽灭菌器在空载情况下及在设计限度方位内是否都能完成良好的运行,记录每个确认结果,根据结果批准是否进行运行验证。若在确认过程中发现偏差,则需要简单描述偏差、记录纠偏措施及完成时间,确认纠偏后方可批准进行运行验证。

1.4 性能确认(PQ)

根据性能确认方案执行高压蒸汽灭菌器模拟实际灭菌程序运行状况的确认及验证,记录每个确认结果,根据结果批准高压蒸汽灭菌器是否可以投入使用。若在确认过程中发现偏差,则需要简单描述偏差、记录纠偏措施及完成时间,确认纠偏后方可批准投入使用。

2 验证方案

2.1 高压蒸汽灭菌器的安装确认(IQ)

(1)设备接收和包装确认:证实仪器包装无缺失和外包装无损坏,检查设备生产厂商名称、设备名称及型号等是否与收货单一致。

(2)设备安装场地确认:根据厂家安装调试准备通知和仪器说明书确认实验室现场是否符合设备安装要求。(3)设备确认:确认设备型号和技术规格符合实验室要求,对照管道图、流程图和线路图检查所有硬件安装以及辅助设施的连接是否恰当。(4)文件及备件确认:确认设备具有充足的文件及备件以能够进行适当的操作和维修,可包括:操作维修手册、说明书、备件清单、工具箱等。(5)关键仪表(仪器)校正确认:查阅每个关键仪表和仪器出厂校正证书,确认校正范围及精度是否符合技术标准,应包括:压力表、安全阀及温度传感器的校正。

2.2 高压蒸汽灭菌器的运行确认(OQ)

(1)启动及控制面板测试:确认设备接电后是否可以正常启动;根据《操作维修手册》中描述的屏幕图示或说明,点击各个功能键确认控制面板能正确显示。(2)空载温度分布测试:确认在灭菌过程中设备能在规定温度下运行,且灭菌持续阶段灭菌介质(蒸汽)能均匀分布在腔体内。将10支或10支以上经过校正的热电偶分别放置在腔体内各点(应包括最冷点),分别在115℃、20min与121℃、15min灭菌程下连续进行3次或3次以上温度测试,每30s记录一次温度。所有测试点的温度都必须达到规定的灭菌温度并切不少于规定的灭菌时间,实际灭菌时间应在设定灭菌时间的±1%以内,最冷点电偶记录的温度与温度探头记录的温度差≤±2℃。(3)断电与续电测试:确认断电后系统信息能完整保存,续电后系统信息不会丢失。在灭菌器运行到规定的灭菌温度后断电,确认其运行状态;然后续电,确认控制面板显示与《操作维修手册》说明一致,且系统信息没有丢失。

2.3 高压蒸汽灭菌器的性能确认(PQ)

(1)负载温湿度分布和热穿透测试:确认在持续灭菌阶段及腔内满载情况下,腔体内温度能满足灭菌要求,且灭菌介质(蒸汽)也能均匀分布在腔体内。将10支或10支以上经过校正的热电偶分别放置在腔体内各点(应包括最冷点),分别在115℃、20min与121℃、15min灭菌程序下连续进行3次或3次以上温度测试,每30s记录一次温度。所有测试点的温度都必须达到规定的灭菌温度并切不少于规定的灭菌时间,实际灭菌时间应在设定灭菌时间的±1%以内,最冷点电偶记录的温度与温度探头记录的温度差≤±2℃。(2)生物指示剂测试:确认在所设定的灭菌程序下能完全杀灭生物指示剂中的芽孢,从而确认该程序的灭菌有效性。此测试与“负载温度分布和热穿透测试”同时进行,在每根热电偶尖端旁放置一份生物指示剂,同时使用一份生物指示剂作为阳性对照。每次温度分布测试结束后,取出生物指示剂在规定温度下进行培养,灭菌后的所有生物指示剂必须显阴性而阳性对照必须显阳性,方可证明灭菌程序是有效的。

3 结语

分析检测仪器(设备)的3Q验证并不是一个新的领域,但由于微生物检测中所使用的精密检测仪器并不多,而某些微生物检测大型仪器,例如生物安全柜、超净工作台、高压蒸汽灭菌器等,大多由生产厂家代于进行验证,导致3Q验证相对于微生物检测实验室而言是一个比较陌生的领域。对于一个微生物检测工作者而言,掌握如何对重要检测分析仪器(设备)进行3Q验证是非常必要的,可以使工作者更了解仪器(设备)本身,有利于检测工作进行。所以本文对食品微生物检测用高压蒸汽3Q验证方案进行总结,使更多食品微生物检测工作者了解如何进行高压蒸汽3Q验证。