1灭菌温度应是一个温度范围，而不是一个固定值
文献中给出的高压蒸汽灭菌温度,通常是一个固定值,如试管斜面培养基和摇瓶液体培养基的灭菌要求为:121℃,20min。但在使用高压蒸汽灭菌锅时，121℃只是灭菌温度的下限,实际的灭菌温度是在121℃~124℃(或123℃)之间进行波动。如果是自动控温型灭菌锅,设定好灭菌温度下限为121℃后﹐当温度升到124℃(或123℃)时,自动断电停止加热,当温度降121℃时,自动开始加热﹔如果是手动控温型灭菌锅，当温度升到124℃时，手动切断电源停止加热，当温度降到121℃时,手动接通电源开始加热。根据实际灭菌锅灭菌使用时的温度是在一定范围内波动的情况,在有关灭菌试验温度的要求上,应该给出具体的温度范围，如121℃~124℃,而不是一个固定值,如121℃。

2不同类型高压蒸汽灭菌锅对排放冷空气的要求不同
2.1非自动控温型灭菌锅︰非自动控温型灭菌锅多为小型灭菌锅,主要是人工控制灭菌温度,以锅盖上安装的双刻度二类计数压力表的指针指示锅内的温度，但是该压力表实际上体现的是锅内压力，温度只是参照压力的变化间接推测出来的,如果不排净冷空气,冷空气热膨胀后对压力锅的工作压力是有贡献的,此时压力和温度就不能一一对应了,显示的温度比锅内的实际工作温度要高，这样因为灭菌锅的工作温度不能达到设定的杀菌温度,就会影响灭菌效果。因此,对于这类灭菌锅必须排净冷空气。
2.2自动控温型灭菌锅﹐自动控温型灭菌锅是通过热敏电极来监测锅内温度(而不是压力)的变化,显示屏上显示的温度是锅内真实的工作温度。因此，在冷空气没有排净的情况下,也能够保证灭菌的温度要求。由于饱和水蒸汽的灭菌效果最好,所以在使用自动控温型灭菌锅时,也应该排放冷空气，提高灭菌效果。自动控温型灭菌锅的下面通常设有排水排气阀,灭菌时可将排水阀向左(向右为排水)旋转少许,让少量蒸汽排出,即可以达到灭菌室温度均衡的目的,又可以起到排放冷空气的作用。也有的灭菌设备上面设有可调排气阀,在灭菌时,始终保持排气阀处于微开状态,就可以起到排出冷空气的作用。

3手提式电加热非自动控温型灭菌锅的控温方法
手提式电加热非自动控温型灭菌锅在使用时的最大问题是需要手动控温,须要专人看护,掉温或超压现象时有发生，为了让手动控温变成自动(或半自动)控温,可采取以下方法:
3.1利用电炉辅助加热，维持恒温试验时,将手提式高压灭菌锅(18L)放于电炉(2 000 W,功率可调)上,开启灭菌锅电源进行常规灭菌操作,当温度达到124℃时,切断灭菌锅电源,开启电炉电源,调节电炉功率至合适位置,靠电炉加热维持灭菌温度的恒定。如果电炉调到最大功率之后,灭菌锅的温度仍然缓慢下降（此时由于灭菌锅内某些灭菌物内部的温度还没有升上来,还要消耗较多的热量)，当温度降至121℃时，再开启灭菌锅电源加热，当温度达到124℃时,再切断灭菌锅
电源,通常经过1~2轮之后﹐只靠电炉的加热就能够维持住恒温了à
3.2利用功率可调插座，维持恒温将18L手提式高压蒸汽灭菌锅接在功率可调插座上，当灭菌温度达到121℃以上时,调节插座输出功率,使温度保持恒定。