根据《兽药生产质量管理规范》 （2002版）的要求， 脉动真空灭菌器的验证内容有安装确认、运行确认 及性能确认，具体确认内容如下： 

1 安装确认 （1）检查及登记设备的厂商名称，设备名称、型 号、生产厂商编号以及生产日期，公司内部设备登记 号； （2）安装地点及安装状况是否符合国家有关压 力容器的要求； （3）设备规格标准是否符合设计要求； （4）计量、仪表的准确性和精确性； （5）设备相应的公用工程和建筑设施的配套如 电源、真空系统、压缩空气系统、冷却水等连接是否 符合供货单位提出的要求； （6）各种附件和备品（如压力表、安全阀、电磁阀 等）的规格、型号是否核对和登记； （7）制定清洗规程及记录格式； （8）制订校正、维护保养及运行的SOP草案及记

录表格式草案。 

2 运行确认 （1）蒸汽压力和温度在设定的范围内；（2）灭菌 器门的联锁系统安全可靠；（3）灭菌器正常运行所需 的各种操作规程是否建立；（4）温度监控设备的选择 和校验符合灭菌程序要求。 合格标准：灭菌器的各步程序运行正常，与操作 说明书相符，无明显偏差；整个运行中，无异常噪声 出现。 

3 性能确认 性能确认所需要进行的验证试验。

3.1 热分布试验 热分布试验是验证灭菌器不同位置的温度均一 性的一项重要试验，以搞清灭菌过程中腔室内各个 不同位置的温差状况，为下一步热穿透试验提供依 据。它包括空载热分布试验、满载（80%装载量）热分 布试验。 

3.1.1 热分布试验步骤 （1）选用10～20个热电偶或热电阻作温度探头， 编号，将其固定在灭菌器腔室的不同位置并用特氟 龙密封带和硅胶密封在灭菌器内。温度探头的安装 位置应包括可能的高温点（如蒸汽入口处）及低温点 （如冷凝水排放口），另外有一只探头置于灭菌器温 度控制探头处，一只探头置于灭菌器温度记录控制 探头附近，其余则均匀分布于灭菌器腔室内，以使温 度的监测具有代表性。在满载（80%装载量）热分布 试验中，装载应尽可能使用待灭菌产品或类似物并 注意不要将温度探头接入待灭菌的容器中，而应在 其周围； （2）按初步设定的灭菌程序、灭菌参数及装载方 式进行灭菌； （3）每种装载方式至少应进行3次重复性试验， 对试验获得的数据进行整理分析，并在此基础上确 定装载的冷点位置； （4）试验前后都要将温度探头放入冰点槽和油浴里校正； （5）通常可在几次空载试验确定出冷点位置后， 进行最大和最小的装载试验； （6）对试验数据作统计分析，最冷点和腔室平均 温度间差值不得超过±2.5 ℃，否则说明设备性能差 或存在某种故障，造成此不良状况的原因在于设计、 安装、装载方式或控制手段存在缺陷，应加以改进。 

3.1.2 空载热分布和满载热分布试验可以接受的 标准 （1）空载热分布灭菌室的温度均匀性≤±1 ℃； （2）满载热分布灭菌室的温度均匀性≤±1.5 ℃； （3）温度控制的范围，根据设备的精度自定。 

3.2 热穿透试验 热穿透试验是验证灭菌器及灭菌程序对产品适 用性的一项试验，目的是确定灭菌室装载中的“最冷 点”，并确认该点在预定的灭菌程序中获得足够的无 菌保证值。 

3.2.1 热穿透试验的步骤及要求 热穿透试验的步骤及要求与满载热分布试验大 体相同，主要不同在于温度探头放置方式上，热穿透 试验要求温度探头应当插入待灭菌产品中，插有温 度探头的产品应放在：（1）热分布试验确定的最冷点 位置；（2）蒸汽入口处或热分布试验确定的其他高温 点位置；（3）灭菌器温度控制探头附近；（4）温度记录 探头处（如果灭菌器的温度自动控制和温度记录不是 共用温度探头时）；（5）另需有记录腔室温度的探头，此 探头不插入产品中，位置在温度控制探头附近。 热穿透试验至少需重复进行3次，试验前后都要 将温度探头放入冰点槽和油浴里校正。 

3.2.2 热穿透试验可接受标准 （1）对于灭菌程序物品，装载中各点所得到的最 小F0值应＞8 min； （2）最小F0值与平均F0值的差值应≯2.5％。 

3.3 生物指示剂验证试验 对热穿透试验结果统计分析可得出灭菌程序的运行参数，进而确定所用灭菌器对某一物品的灭菌 程序。然后还要进行生物指示剂验证试验，即将一定 量已知D值的耐热孢子接入被灭菌的物品中，在预 定的灭菌条件下灭菌，以验证设定的灭菌工艺是否 真正能赋予物品所需的标准灭菌时间F0值。 蒸汽压力灭菌程序验证，常用的生物指示剂有 嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus stereathernophilus，其常规 微生物耐热参数D121 ℃值为（1.5～3.0）min。由于同 一生物指示剂在不同介质或载体上的耐热性不同， 所以在试验前要测定生物指示剂在待灭菌物品中的 耐热性，并根据其耐热性确定验证时所要接种的孢 子数量，或是否需要选用一种标准溶液来替代某物 品作为生物指示剂的介质。 生物指示剂的装载：为了准确反映灭菌程序对 物品的灭菌效果，生物指示剂通常被接种入被验证 物品的包装容器中，如生物指示剂与被验证物品不 相容，可用pH值及黏度与物品相似的介质，生物指 示剂验证可与热穿透试验同时进行，装有生物指示 剂的容器要紧挨着装有测温探头的容器，在灭菌设 备的最冷点处必须放置生物指示剂，冷点通常位于 蒸汽或冷凝水出入口附近，为便于准确分析验证试 验结果，所有的生物指示剂与测温探头的放置应有 相对应的编号。 生物指示剂验证合格标准为：经生物指示剂验 证后可证明在设定的灭菌程序或F0条件下，物品的 无菌保证水平低于10-6。