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口腔器械灭菌方法探讨

[导读]采用压力蒸汽与化学消毒剂两种方法对人工污染及临床使用后自然污染牙科手机、车针等口腔科 器械进行灭菌处理 ,观察比较灭菌效果

本实验研究的目的是采用压力蒸汽与化学消毒 剂两种方法对人工污染及临床使用后自然污染牙科 手机、车针等口腔科器械进行灭菌处理 ,观察比较灭 菌效果。探讨适用于口腔科临床工作需要的灭菌方 式。结果报告如下。
1  材料与方法

1. 1 材料

1. 1. 1 实验菌 采用卫生部《消毒实验技术规范》 中规定的标准菌株 ,金黄色葡萄球菌 ( ATCC6538); 白色念珠菌 ( ATCC10231) ,由中国军事医学科学院微生物流行病学研究所提供。 TTV、 HBsAg由北京 大学人民医院肝病研究所提供。

1. 1. 2 口腔器械 实验采用目前临床使用机会较 多的 N SK MCH-QD J-M4高速手机、 IS-25低速手 机、车针、扩大针、吸唾器。

1. 1. 3 灭菌器材 ( 1)化学消毒剂 戊二醛、含氯 消毒剂 ,均为国家批准生产获卫生许可的消毒产品。 ( 2)压力蒸汽灭菌器。

1. 1. 4 压力蒸汽灭菌指示器材 ( 1)美国 3M公司 生产的 3M化学指示胶带、 3M化学指示卡。 ( 2)生 物指示器材: 嗜热脂肪杆菌芽胞 ( ATCC7953)由中 国军事医学科学院微生物流行病学研究所提供。 ( 3) HBsAg、 T TV试剂盒均由北京科华公司提供

1. 1. 5 培养基 普通营养琼脂培养基、溴甲酚紫蛋 白胨水培养基均由本实验室制备;流体硫乙醇酸盐 培养基、真菌培养基均由中国药品生物制品检定所 生产。

1. 2 方法

1. 2. 1 器械人工染菌、染病毒方法 分别取金黄色 葡萄球菌 ( ATCC6538)、白色念珠菌 ( ATCC10231) 菌种第 3-14代营养琼脂斜面 18~ 24 h新鲜培养物 用磷酸盐缓冲液制备成含菌量为 107~ 108 CFU /ml 的菌悬液;用含 5% 小牛血清 PBS稀释配制 TTV 及 HBsAg悬液至试验浓度 50μ g /L。分别将手机远 端 5cm、吸唾器远端 5 cm、车针、扩大针全部浸入试 验菌悬液、 T TV及 HBsAg悬液中 ,沥干 ,置 37℃恒 温干燥 30 min后进行实验。

1. 2. 2 压力蒸汽灭菌实验 将人工污染、临床使用 后污染口腔器械用双层纯棉布袋包装后放入压力蒸 汽灭菌器中灭菌处理。 将不经压力蒸汽灭菌处理同 批污染器械设为阳性对照组;同批实验用洗脱液、培 养基为阴性对照组。对灭菌后器械进行无菌检查。

1. 2. 3 消毒剂灭菌实验

1. 2. 3. 1 中和剂鉴定试验 以金黄色葡萄球菌、白 色念珠菌为试验菌进行试验。试验分 8组: 消毒剂+ 菌液; (消毒剂+ 菌液 )+ 中和剂; (消毒剂+ 中和剂 ) + 菌液;磷酸盐缓冲液 ( PBS, 0. 03 mol /L, pH7. 2) + 菌液;中和剂+ 菌液; PBS 、中和剂、培养基直接培 养。试验结果 ,当第 1组不长菌或菌数远少于第 2 组; 6 、 7、 8组不长菌;第 3、 4、 5组组间菌数误差率不
超过 10%时 ,表明所用中和剂及使用浓度适宜。

1. 2. 3. 2 灭菌实验 分别将人工污染、临床使用后 污染口腔器械裸露完全浸没于不同消毒剂中 ,浸泡 至预定时间后取出 ,立即放入相应中和剂中中和 ,压 力蒸汽灭菌。 对灭菌后器械进行无菌检查 ,以 PBS 代替消毒剂处理同批污染器械为阳性对照组;同批 实验用中和剂、培养基直接培养作为阴性对照组。 1. 2. 4 器械灭菌效果检查 分别将灭菌后器械放 入真菌培养基、流体硫乙醇酸盐培养基中直接培养。 观察记录实验结果。

2 结 果

2. 1 对人工污染器械灭菌效果 压力蒸汽灭菌对 器械上污染的白色念珠菌的杀灭效果明显优于化学 消毒剂。 由于车针、扩大针结构简单 ,污染部位能够 充分暴露于消毒剂中 ,因此灭菌效果较好;手机、吸 唾器缝隙较多 ,消毒剂与其上污染的白色念珠菌不 能充分接触 ,因此灭菌不彻底。压力蒸汽灭菌对器械 上污染的金黄色葡萄球菌杀灭效果明显优于化学消 毒剂。化学消毒剂对车针、扩大针上污染的金黄色葡 萄球菌杀灭作用较手机、吸唾器彻底。手机经消毒剂 处理后 ,仍有 5件金黄色葡萄球菌检测阳性。对人工 污染器械上 HBsAg、 T TV灭活效果 ,压力蒸汽灭菌 能够彻底灭活器械上污染的 TTV、 HBsAg抗原性。 化学消毒剂不能完全灭活所有器械上污染的 T TV、 HBsAg抗原性。 结果见表 1。
2. 2 对临床使用后器械灭菌效果比较 压力蒸汽 灭菌对临床使用后器械灭菌效果明显优于化学消毒 剂。对临床使用后器械上污染的病毒灭活效果 ,压力 蒸汽灭菌处理能够彻底灭活临床使用后器械上污染
的 TTV、 HBsAg抗原性。化学消毒剂灭菌处理后器 械上污染的 T TV仍为阳性、 HBsAg抗原性检测有 11. 25%仍为阳性。 结果见表 2。
2. 3 压力蒸汽灭活 HBsAg 抗原性、 TTV所需时 间  HBsAg抗原性、 TTV 对 135℃压力蒸汽灭菌 耐受性均较强 ,完全破坏 HBsAg 抗原性需要 6 min、完全灭活 T TV需要 10 min。 2. 4 器械无菌检查结果 对灭菌后细菌及 TTV、 HBsAg抗原性检测阴性器械进行无菌检查。经压力 蒸汽灭菌及 T TV、 HBsAg抗原性灭活的器械 ,无菌 检查均合格;经化学消毒剂灭菌及 HBsAg抗原性 灭活的器械有 2. 69%无菌检查不合格。 见表 3。

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