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台式压力蒸汽灭菌器的应用及其灭菌效果观察

[导读]观察台式压力蒸汽灭菌器在特殊物品灭菌中的应用及其灭菌效果。方法 通过化学指示剂监测法, 观察了小型台式压力蒸汽灭菌器对细胞培养用品和配液的灭菌效果。结果 用内源蒸汽台式压力蒸汽灭菌器,在 121℃条件下对细胞培养配液灭菌 25 mi n , 对细胞培养配液达到灭菌通过; 在 132℃条件下灭菌 12 mi n ,对手术器 械、玻璃培养器皿、胶塞等物品包达到灭菌通过

 小型台式压力蒸汽灭菌器是近年来逐渐在医院 推广使用的应急快速灭菌设备,适用于各种耐高温 耐高压手术器械。本研究旨在探讨台式压力蒸汽灭 菌器用于眼科实验室细胞培养器械物品和细胞培养 液及其他各种用液的灭菌可能性。试验所用灭菌器 为一种台式压力蒸汽灭菌器,为电热内源蒸汽方式, 灭菌程序可随机设定。灭菌器的控制由微电脑控制 系统完成,其升温快,控制精确稳定,灭菌器操作方 便,灭菌效果可靠。选择本医院眼科实验室细胞培养用品为对象,先后进行了 1 200次灭菌处理,同时 进行了灭菌效果监测和灭菌物品使用验证,效果满 意。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1. 1 试验材料 试验仪器设备有台式压力蒸汽灭菌器,由连云 港千樱医疗设备有限公司生产; 恒温干燥箱,为广州 市雄发仪器有限公司产品; 超净工作台,为广州市苏 泰空调净化设备有限公司和番禺雷蒙特科学实验设 备厂提供。 特殊器材包,内含手术器械、玻璃培养器皿、胶 塞等; 细胞培养配液,本实验室自行配制。

1. 2 试验方法

1. 2. 1 试验准备 ①细胞配液清洗: 所需玻璃器皿经清洗后,用硫酸 -重铬酸钾洗液浸泡过夜,用清 水冲洗干净,再用重蒸水冲洗数十次,烤干后用纱布 牛皮纸棉线包扎瓶口,然后经压力蒸汽灭菌。 ②过 滤装置准备: 把用于配液过滤的过滤器装好滤膜,用 2层布包好,经压力蒸汽灭菌。③胶塞准备: 将待 用胶塞置于清洁剂溶液内煮沸 10 mi n ,清水洗净,再 置于重蒸水中煮沸 10 mi n ,重复煮沸 2次,烤干,待 包装。 ④特殊器械包: 将准备好的手术器械、培养 器皿、胶塞等放入用方盒,用 2层布包好,经压力蒸 汽灭菌。⑤各种液体准备: 将重蒸水和 D-Ha nk s 液分别装入洁净玻璃瓶内,加盖释压胶塞,用 121℃ 下排气式压力蒸汽灭菌。 ⑥监测器材: 所有待灭菌 的物品包外贴封 3M压力蒸汽灭菌指示胶带。 

1. 2. 2 灭菌前准备 进行常规工艺检查,包括压力 蒸汽灭菌器的压力表、温度表、报警器等,加水并检 查水位线,检查等待灭菌物品包装的完整性,放置指 示物等。

1. 2. 3 灭菌步骤 按规范要求装载好待灭菌物品, 关闭灭菌器锁扣,接通电源; 设定液体物品用 121℃ 灭菌 25 mi n ; 特殊器材包用 132℃灭菌 12 mi n ; 启动 灭菌程序。灭菌结束后,将灭菌后的物品包移入 60℃电热恒温干燥箱干烤 1~ 2 h后,储存于细胞培 养房的无菌柜备用。

1. 2. 4 结果观察 首先检查灭菌物品包化学指示 器材变色是否合格; 定期( 有效期 1周) 取出储存物 品进行无菌检验。使用台式压力蒸汽灭菌器灭菌处 理的物品,经细胞培养实际应用,观察细胞生长情 况,以判定灭菌物品对细胞生长的影响。

2 结果

2. 1 监测结果 结果表明,小型台式压力蒸汽灭菌器对眼科实 验室各种特殊器械包和各种液体包装灭菌处理后, 所有化学指示剂的指示色块变色均符合标准色,化 学监测全部通过。各种灭菌后的特殊器械包和配液 在有效储存期内,经无菌检验全部无菌生长,保持灭 菌合格。

2. 2 实际应用结果 经使用该灭菌器灭菌的器材和配液进行各种细 胞培养结果证明,所培养的视网膜色素上皮细胞、人 脐静脉内皮细胞、人视网膜微血管内皮细胞等都生 长良好( 见扉页彩图 1a ~d )。

3 讨论
小型台式压力蒸汽灭菌器是近年来迅速发展起 来的一类医用灭菌设备,通常称之为快速压力蒸汽 灭菌器,主要用于医疗机构特殊器械和应急器械快 速灭菌。由于此类灭菌装置可安装在使用器材的现 场或附近,因而其实用性比较广泛。此类灭菌器有 下排气式,也有预真空式,灭菌物品可以包装后即灭 即用。本研究旨在观察此类灭菌器对实验室内特殊 器材和各种培养液的灭菌效果和实际应用的影响, 以便为细胞培养工作者提供便利和提高工作效率。 我们在使用该灭菌器过程中,把灭菌前的准备工作 做得很充分,更加重视各种工艺检查。实践证明,小 型灭菌器内待灭菌物品不能装满,应留有空间,以利 于冷空气排除和蒸汽穿透。从灭菌开始到结束每一 步都要严格按要求进行操作,保证消毒灭菌效果; 干 燥箱烤干灭菌后物品是利用热空气消毒灭菌,烤箱 通电加热后的空气在一定空间不断对流,产生均一 效应的热空气穿透物体,在灭菌消毒后再把物品烤 干达到热空气消毒后,取出备用。 在评价灭菌效果过程中〔1 , 6〕,主要采用化学监 测法〔2〕,而没有采用生物指示剂,观察生物效果主 要采用对灭菌物品的无菌检验加以证明。灭菌结果 证明,用该灭菌器灭菌处理后的物品在有效期内都 保持无菌状态〔3〕,同时观察到各种灭菌物品对多种 细胞生长均无不良影响。压力蒸汽灭菌效果监测包 括程序监测、化学指示监测和生物监测〔4-6〕,但最直 接的监测是无菌检验,结果可靠。

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